NewEast Biosciences Arf6激l活检测试剂盒基于特定于配置的单克l隆抗l体和Arf6特异性兔多克l隆抗l体,该抗l体特异性识别Arf6-GTP,但不能识别Arf6-GDP。 鉴于单克l隆抗l体对其抗原的高度亲和力,可以在短时间内进行激l活测定。 该测定法可提供可靠的结果,并具有一致的可重复性。
Gα13活化试验。MEF细胞分别用LPA(第2道)或不加LPA(1道)处理。细胞裂解物用抗活性Gα13单克l隆抗l体(Cat)孵育。#26902)(顶面板)。这个用抗Gα13兔多克l隆抗l体(Cat)免l疫印迹法检测沉淀活性Gα13#21005年)。底部的面板显示了用抗Gα13的细胞裂解物的Western blot(5%在顶部面板中使用的)。
试剂盒成分
特异性识别Cdc42活性构象的鼠单克l隆抗l体(Anti-active Cdc42,G蛋白活性检测试剂盒, Mouse MonoclonalAntibody (Catalog No. 26905)):小管装--30ul (抗l体浓度是1mg/ml),抗l体溶于PBS(pH7.4)并包含50%的甘油和0.05%的叠氮l化钠。此抗l体可以特异性识别所有脊椎动物中的Cdc42-GTP。
Protein A/G agarose (Catalog No. 30301) :小管装—400ul包含200ul Protein A/G agarose 和200ul 20%乙醇溶液。(使用时溶液需要充分混匀,再吸取)
5X Assay/Lysis Buffer (Catalog No. 30303):小瓶装—30mL包含250 mM Tris-HCl (pH 8.0), 750 mM NaCl, 50 mM MgCl2, 5 mM EDTA, 5% Triton X-100。
特异性识别Cdc42活性构象的兔多克l隆抗l体(Anti-Cdc42, Rabbit Polyclonal Antibody (Catalog No.21010)):小管装--30ul (抗l体浓度是1mg/ml),抗l体溶于PBS(pH 7.4)并包含有 50%的甘油。
100 X GTPγS (Catalog No. 30302) :小管装—100ul (10 mM) ,实验中0.5mL细胞裂解液使用 5ul GTPγS标记。
100 X GDP (Catalog No. 30304) :小管装—100ul (100 mM) ,实验中0.5mL细胞裂解液使用5ul GDP标记。
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